Chi siamo
Dove siamo
Il laboratorio di microscopia confocale si trova presso il piano terra del Plesso Biologico Integrato in Via Volturno 39
Cosa facciamo
La microscopia confocale consente di acquisire immagini eliminando l’interferenza delle fluorescenze out-of-focus su preparati vivi o fissati sottoposti a marcature fluorescenti. La produzione dell’immagine confocale si ottiene mediante l’illuminazione del campione con un fascio di luce laser che viene sequenzialmente focalizzato su ogni singolo punto del preparato, sia lungo il piano XY che Z. L’acquisizione di più piani confocali del campione analizzato ne permette quindi la successiva ricostruzione tridimensionale mediante l’uso di specifici software. L’evoluzione tecnologica in ambito di microscopia confocale ha consentito lo sviluppo di sistemi confocali sempre più performanti in termini di velocità di scansione, potere risolutivo e sensibilità di detection dei segnali fluorescenti. Nel Laboratorio di Microscopia Confocale, afferente al Dip.to di Medicina e Chirurgia del nostro Ateneo, è stato installato un sistema confocale di ultima generazione fornito dall’azienda Leica Microsystems.
Principali strumentazioni in dotazione
Il sistema confocale LEICA Stellaris 5 è così equipaggiato:
-microscopio DMi8 a revolver rovesciato dotato di 4 obiettivi (10X/0.3; 20X/0.7; 40X/1.3 oil; 63X/1.4 oil) e stage motorizzato sull’asse XYZ
-laser Bianco e filtro dicroico AOBS programmabile per la separazione simultanea fino a 8 line laser in eccitazione e comprese tra 470 nm e 670 nm. Il modulo Laser è completato da una sorgente a 405 nm per l’eccitazione nell’UV.
-sistema di rivelazione della fluorescenza è munito di 3 photo detector spettrali “HyDS” indipendenti ad alta efficienza quantica e configurabili per acquisizioni in modalità analogica, conta fotonica o λ-scan.
-modalità di acquisizione “Lightning” per super risoluzione fino a 120nm sugli assi XY e 320nm sull’asse Z
-incubatore top stage a CO2 per studi morfo funzionali in time-lapse su colture cellulari vive
-doppia licenza del software LasX per elaborazioni 3D, Co-localizzazione, FRAP, FRET e consentire l’analisi di precedenti acquisizioni in modalità offline, su piattaforma hardware indipendente dal sistema confocale.
Il servizio di microscopia confocale si completa con il recente aggiornamento di uno stativo Zeiss Axiovert 200 adibito ad uso widefield a fluorescenza. Il sistema consente l’acquisizione di immagini digitalizzate di preparati biologici fissati o vitali grazie all’integrazione di un incubatore a CO2. Il microscopio ha lo scopo di fornire un servizio di valutazione preventiva ad una approfondita analisi confocale del campione in esame oltre a quello di fornire una soluzione alternativa in caso di segnali fluorescenti particolarmente deboli non rilevabili con un approccio confocale.
Il sistema di microscopia widefield a fluorescenza Zeiss Axiovert 200 è così configurato:
-stativo a revolver rovesciato dotato di 5 obiettivi (10X/0.3; 20X/0.7; 40X/1.3 oil; 63X/1.4 oil; 100X/1.4 oil)
-3 set di filtri in eccitazione (BP 365/12; BP 450-490; BP 546/12)
-camera digitale a colori Axiocam 305 controllata da software ZEN
-possibilità di acquisizioni multicanale
Come prenotare le sedute di analisi
-per utenti interni, contattando il personale autorizzato all’uso del microscopio afferente al proprio Dipartimento
-per i Dipartimenti di Ateneo che non hanno identificato nessun referente, rivolgendosi a chiunque del personale autorizzato disponibile ad effettuare le misure
-per utenti esterni, rivolgendosi a chiunque del personale autorizzato disponibile ad effettuare le misure
Per programmare le sedute di analisi, consultare l’agenda di utilizzo della strumentazione di interesse collegandosi al seguente link:
LINK
Tariffario del servizio di Microscopia Confocale:
Tipo di analisi | UTENTE INTERNO | UTENTE ESTERNO |
Nuova acquisizione | 60 euro /4h* | 200 euro/4h |
Extra time** | 10 euro/h | 30 euro/h |
Elaborazioni post processing | 10 euro/h | 30 euro/h |
* si intendono ore-macchina minime prenotabili, corrispondenti a mezza giornata di servizio
** si intende tempo macchina oltre le 8h di servizio
Tariffario per osservazioni widefield (ZEISS AXIOVERT 200)
Tipo di analisi | UTENTE INTERNO | UTENTE ESTERNO |
Nuova acquisizione | 10 euro/h | 30 euro/h |
IMPORTANTE!! La prenotazione può essere disdetta:
- per campioni FISSATI fino al terzo giorno lavorativo precedente alla data richiesta
- per campioni VIVI fino a 24 ore precedenti alla data richiesta
Il mancato utilizzo comporta, in assenza di disdetta in tempo utile, il pagamento del servizio
