Studi di fisiopatologia del Sistema Immunitario nel corso dell’invecchiamento e di patologie 

Principali linee di ricerca

• Studi sul ruolo dell’infezione cronica da cytomegalovirus nelle modificazioni del Sistema Immunitario nel corso dell’invecchiamento umano e in condizioni patologiche (ictus, sclerosi sistemica)
• Studio delle alterazioni immunitarie associate al Mieloma Multiplo
• Studio delle modificazioni del Sistema Immunitario in animali con quadri patologici

Tecniche in uso

• Colture di cellule primarie a termine e di linee cellulari continue
• Allestimento di banche di materiale biologico
• Immortalizzazione di linee linfoblastoidi umane
• Isolamento di popolazioni e sottopopolazioni cellulari del Sistema Immunitario mediante mezzi fisici (gradienti di Ficoll-Hypaque, Percoll, Metrizamide etc.) e immunoselezione con anticorpi (biglie magnetiche)
• Preparazione, acquisizione e analisi multiparametrica in citometria a flusso di campioni cellulari (freschi, fissati e congelati) marcati con anticorpi monoclonali diretti contro molecole di superficie e intracellulari (intracitoplasmatiche ed intranucleari)
• Test citofluorimetrici per lo studio di popolazioni antigene-specifiche e del fenotipo cellulare funzionale (produzione di citochine intracellulari, espressione di marcatori di attività citotossica) e della cinetica cellulare compresi test di vitalità, di rilevamento del ciclo cellulare e dell'apoptosi
• Test in vitro di funzionalità cellulare specifica: test di proliferazione cellulare, test di citotossicità, produzione e dosaggio di citochine (ELISA) e test d’induzione dell'apoptosi.

Principali strumentazioni in dotazione

• Cappe di sicurezza biologica di classe II (GELAIRE BSB4 e GELAIRE TC48)
• Incubatore CO2 (Heraeus, CO2 AUTO-ZERO)
• Centrifughe refrigerate da banco (Allegra X-22R BECKMAN COULTER, SL16R Thermo Scientific)
• Citofluorimetro FACSCalibur (Becton Dickinson)
• Microscopi ottici (ZEISS, DIAPLAN LEITZ, DIAVERT LEITZ)

EX LABORATORIO DI FISIOPATOLOGIA CARDIOVASCOLARE

Principali linee di ricerca:

L’attività di ricerca sviluppata dal laboratorio fa riferimento sia dal punto di vista sperimentale che clinico ai meccanismi implicati nello sviluppo della ipertensione arteriosa e delle sue complicanze, fra le quali lo scompenso cardiaco, oltre al ruolo della Zinco-alfa2 glicoproteina nella cachessia.

Nello specifico sono approfondite 2 linee di ricerca:

1) Lo studio dei meccanismi implicati nello sviluppo di ipertensione arteriosa e nei modelli sperimentali della stessa valutando le interazioni fra parametri di stress ossidativo e nitrosativo (generazione delle specie radicolari dell’ossigeno e dell’azoto), parametri correlati all’ attivazione del sistema simpatico, del sistema renina-angiotensina-aldosterone e dei peptidi natriuretici. Tali elementi vengono valutati insieme agli squilibri del bilancio sodico, idrico e metabolico dalle prime fasi di sviluppo fino al mantenimento dell’ ipertensione arteriosa e successivamente fino al manifestarsi di danni d’organo quali la congestione polmonare legata allo scompenso cardiaco.

2) Ruolo della Zinco-alfa2 glicoproteina nella cachessia di varia origine tramite un approccio di studio traslazionale: a) studi in vitro che mirano a valutare l’azione della Zinco-alfa2 glicoproteina (lipid mobilizing factor) nelle alterazioni del metabolismo lipidico ed energetico cellulare in due popolazioni cellulari isolate (colture cellulari primarie di adipociti e di cardiomiociti isolati) ed in modelli sperimentali di cachessia cardiaca e uremica; b) studio clinico in soggetti con cachessia che valuta il ruolo della Zinco alfa 2 glicoproteina (lipid mobilizing factor) nello sviluppo di 3 tipologie di cachessia quella cardiaca, uremica e neoplastica.

Tecniche in uso::

Colture cellulari primarie; tecniche microdialitiche; metodiche analitiche (tecniche ELISA, immunoblotting, immunistochimica). Modelli animali di patologia.

Principali strumentazioni in dotazione:

• Cellometer, Nexcelom (Mod. Auto T4 Cell Counter)
• Sistema cuore isolato, RADNOTI/Ugo Basile (Mod. 4803)
• Trasduttore di forza isometrica, Ugo Basile (Mod. 7003)
• Cella Elettroforetica + Sistema trasferimento gel, Biorad/Invitrogen (Mod. 1703930)
• Sistema a pompa per microdiffusione, CMA Microdialisis A.B. (Mod. CMA/100)
• Misuratore di Pressione, W+W electronic (Mod. BP Recorder 8002)
• Amplificatore segnali     AD Instrument/Ugo Basile (Mod. Quad Bridge ML118)
• 2 Trasduttori di pressione, World precision instrument/Ugo Basile (Mod. BLPR)
• Sistema acquisizione segnali Powerlab, AD Instrument/Ugo Basile (Mod. Powerlab 400)
• Trasduttore isometrico, Ugo Basile (Mod. DY1 7003)

Parole Chiave: Fisiopatologia cardiovascolare, Ipertensione arteriosa, Scompenso cardiaco,